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带主动溶剂调制的Agilent InfinityLab二维液相解决方案

主动溶剂调制提供了一种基于阀的方法来解决二维液相色谱中第一维 (1D) 与第二维 (2D) 溶剂系统不兼容的问题。


摘要 

二维液相色谱 (2D-LC) 方法开发中的一项重大挑战是第一维 (1 D) 与第二维 (2 D) 溶剂 系统不兼容。在充满挑战的分离系统组合中,2 D 中可观察到流穿峰、峰展宽或变形 峰等体积过载效应。主动溶剂调制 (ASM) 提供了一种基于阀的方法来解决该问题, 可提高 2 D 中的分离度和灵敏度。本篇技术概述阐述了 ASM 的原理,并展示其在两 种反相 (RP) 液相色谱分离组合及亲水相互作用液相色谱 (HILIC) 和 RPLC 组合中发 挥的作用。


结论 

2D-LC 方法开发中的一项重要挑战是 1 D 与 2 D 溶剂系统不兼容。对于 1 D 洗脱液中的 分析物在 2 D 色谱柱中保留性较低的分离 系统组合,2 D 中可能会观察到流穿峰、 峰展宽或变形峰等体积过载效应。主动溶 剂调制提供了一种基于阀的方法,在 2 D 色谱柱前用 2 D 流动相稀释 1 D 洗脱液,解 决了这一问题,从而实现了 2 D 色谱柱头 处的分析物集中。 

在 PAH 的 RPLC-RPLC 分析中,未使用 ASM 时将出现 2 D 峰展宽和变形峰。在 ASM 稀释因子为 2 的条件下使用 ASM 时,2 D 色谱柱头实现分析物集中,从而获 得了对称的 2 D 窄峰。在多肽的 HILIC-RPLC 分析过程中,未使用 ASM 的2 D 中出现了多 肽的部分流穿。在 ASM 稀释因子为 5 的条 件下使用 ASM 时,多肽实现了完全保留。


参考文献 

1. Stoll, D. R.; Carr, P. W. Two-Dimensional Liquid Chromatography: A State of the Art Tutorial. Analytical Chemistry 2017, 89, 519-531 

2. Stoll, D. R.; et al. Active Solvent Modulation: A Valve-Based Approach To Improve Separation Compatibility in Two-Dimensional Liquid Chromatography. Analytical Chemistry 2017, 89, 9260-9267 

3. Li, D.; Jakob, C.; Schmitz, O. Practical considerations in comprehensive two-dimensional liquid chromatography systems (LCxLC) with reversed-phases in both dimensions. Analytical and Bioanalytical Chemistry 2015, 407, 153-167


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